ई. डी. मित्सा, एल.यू. कोकाएवा, एस.एन. एलांस्की
Oomycete फायटोफोथोरा संक्रमण (मॉन्ट) डी बॅरीमुळे उशीरा ब्लाइट होतो, बटाटे आणि टोमॅटोचा एक धोकादायक रोग. प्राथमिक इनोकुलमच्या मुख्य स्त्रोतांपैकी एक पी infestans जाड-भिंतींच्या विश्रांतीची पुनरुत्पादक संरचना आहेत - oospores.
संकरित ओस्पोर्स, अनुवांशिकदृष्ट्या भिन्न पॅरेंटल स्ट्रेन ओलांडण्याच्या परिणामी तयार होतात, लोकसंख्येमध्ये जीनोटाइपिक विविधता वाढवण्यास हातभार लावतात, परिणामी नवीन जाती आणि लागू केलेल्या बुरशीनाशकांमध्ये स्ट्रॅन्सचे रुपांतर करण्याची प्रक्रिया वेगवान होते.
ओस्पोर निर्मिती पी infestans जगातील अनेक देशांमध्ये या क्षेत्राची नोंद घेतली गेली: रशिया (स्मिरनोव एट अल., 1999), नॉर्वे (हर्मनसेन एट अल., 2002), स्वीडन (स्ट्रोमबर्ग एट अल., 2001), नेदरलँड्स (केसल एट अल., 2002) आणि इतर प्रदेश. ओस्पोर्स जमिनीत 2 वर्षांहून अधिक काळ व्यवहार्य अवस्थेत टिकून राहण्यास सक्षम असतात (Bødker et al., 2006) आणि जास्त हिवाळा झाल्यानंतर वनस्पतींना संसर्ग होतो (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
पूर्वी असे दर्शविले गेले होते की बटाटा बुशच्या वेगवेगळ्या स्तरांच्या वनस्पतींच्या पानांमध्ये उशीरा अनिष्ट परिणामास प्रतिकारशक्तीमध्ये फरक आहे; ते खालच्या पानांपासून वरच्या पानांपर्यंत वाढते. ही प्रवृत्ती पानांचे वय, वनस्पतींचे वय किंवा बटाट्याच्या विविधतेवर अवलंबून नाही (वेस्पर एट अल., 2003). त्याच वेळी, आम्हाला साहित्यात बटाटा बुशच्या वेगवेगळ्या स्तरांच्या पानांमध्ये ओस्पोर निर्मितीच्या तीव्रतेतील फरकांवरील डेटा शोधण्यात अक्षम होतो. तथापि, जर असे फरक अस्तित्वात असतील, तर ओस्पोर निर्मितीच्या विश्लेषणासाठी पानांचे नमुने घेताना आणि इतर लेखकांनी मिळवलेल्या परिणामांचा अर्थ लावताना ते विचारात घेतले पाहिजेत. या कामाचे उद्दिष्ट आर्द्र कक्षांमध्ये समान स्थितीत ठेवलेल्या बटाटा वनस्पतीच्या वेगवेगळ्या थरांच्या विलग केलेल्या पानांमध्ये ओस्पोर्सच्या निर्मितीचा अभ्यास करणे हा होता.
साहित्य आणि पद्धती
आम्ही 5 अलगाव वापरले पी infestans मॉस्को, रियाझान आणि लेनिनग्राड प्रदेशातून आणलेल्या प्रभावित नमुन्यांमधून वेगवेगळ्या प्रकारचे वीण वेगळे केले गेले. यापैकी, आगर ओटच्या माध्यमात चाचणी केल्यावर विपुल प्रमाणात ओस्पोर्स देणार्या विविध प्रकारच्या वीणाच्या 3 जोड्या निवडल्या गेल्या.
चाचणीसाठी, आम्ही ग्रीनहाऊसमध्ये (पीट सब्सट्रेटमध्ये) उगवलेल्या खालील वाणांच्या विषाणू-मुक्त बटाटा वनस्पती वापरल्या: लवकर सँड्रीन, झोराच्का, उलादार, ओसीरस, मध्य-लवकर इलिंस्की, मध्य-हंगाम यंका.
विश्लेषणासाठी बटाटा वनस्पतीच्या विविध स्तरांतील साधी पाने निवडण्यात आली. खालच्या स्तरावरून तीन पाने निवडली गेली (4 खालच्या कंपाऊंड पाने), तीन वरून (3-4 कंपाऊंड पाने शीर्षस्थानी), आणि तीन पाने बुशच्या मध्यभागी होती. साध्या पानांचे वजन केले गेले, कोऑर्डिनेट पेपरवर फोटो काढले गेले (आवाज आणि क्षेत्रफळ मोजण्यासाठी), आणि नंतर निर्जंतुक पाण्याच्या पृष्ठभागावर उलथापालथ करून पेट्री डिशमध्ये 25 मिली ओतले. नंतर प्रत्येक पानाला zoosporangia पृथक्करण A1 आणि A2 च्या मिश्रित निलंबनाच्या एका थेंबाने संसर्ग झाला. प्रत्येक स्तरावरून घेतलेल्या तीन पानांसाठी, पृथक्करणाच्या तीन वेगवेगळ्या जोड्यांचा एक इनोकुलम वापरला गेला. एका पानाला एक जोडी आयसोलॅट्सच्या इनोकुलम मिश्रणाने संसर्ग झाला होता.
झूस्पोरॅन्गियाचे निलंबन तयार करण्यासाठी, आगर ओटच्या माध्यमावर 7 दिवसांसाठी वेगवेगळ्या प्रकारचे वीण तयार केले गेले, त्यानंतर झूस्पोरॅंगिया निर्जंतुकीकरण केलेल्या डिस्टिल्ड पाण्याने धुतले गेले. 5x च्या विस्ताराने सूक्ष्मदर्शकाच्या दृश्याच्या क्षेत्रात इनोकुलमची एकाग्रता 7-80 zoospores होती. प्रत्येक पानाला zoosporangia पृथक्करण A1 आणि A2 च्या मिश्रित निलंबनाच्या एका थेंबाने संसर्ग झाला होता.
सर्व प्रयोगांमध्ये, प्रति प्रकारात 3 बटाट्याची पाने वापरली गेली. 20 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 18 दिवस उष्मायनानंतर, प्रत्येक पान 2 मिली डिस्टिल्ड वॉटरसह मोर्टारमध्ये एकसंध केले गेले. परिणामी निलंबनापासून, 3 नमुने घेतले गेले, ज्यामधून मायक्रोस्कोपीची तयारी तयार केली गेली.
प्रत्येक प्रकारात, 180 व्हिज्युअल फील्डची तपासणी केली गेली, त्यानंतर 1 मिमी प्रति ओस्पोर्सची संख्या पुन्हा मोजली गेली.2 शीटची पृष्ठभाग. प्रत्येक प्रकारासाठी मोजणीचे परिणाम सरासरी काढले गेले.
0,05 च्या महत्त्वाच्या पातळीसाठी आत्मविश्वास मध्यांतर (μ) ची गणना करण्यासाठी, खालील सूत्र वापरले होते
जेथे s मानक विचलन आहे, n ही मोजमापांची संख्या आहे, t 0,05 च्या महत्त्वाच्या पातळीसाठी t-चाचणी स्थिरांक आहे. सर्व गणना एक्सेल (मायक्रोसॉफ्ट ऑफिस पॅकेज) मध्ये केली गेली.
निकाल आणि चर्चा
बटाट्याच्या झुडुपाच्या वेगवेगळ्या थरांतून गोळा केलेल्या पानांचे टोचणे आणि त्याच स्थितीत आर्द्र खोलीत ठेवल्याने ओस्पोर निर्मितीच्या तीव्रतेत फरक दिसून आला. सर्व अभ्यासलेल्या वाणांमध्ये, बुशच्या खालच्या आणि मध्यम स्तरांमधून गोळा केलेल्या पानांच्या टोचण्या दरम्यान ओस्पोर्सची जास्तीत जास्त संख्या तयार झाली. खालच्या आणि मध्यम पानांमध्ये ओस्पोर्सच्या निर्मितीमध्ये कोणतेही महत्त्वपूर्ण फरक आढळले नाहीत.
वरच्या थराच्या पानांमध्ये ओस्पोर्सची किमान संख्या तयार झाली (चित्र 1).
खालच्या आणि मध्यम स्तरांच्या पानांमध्ये, सँड्रीन, इलिंस्की, झोराच्का, उलादार आणि ओसीरिस या जातींमध्ये ओस्पोर्सची जास्तीत जास्त संख्या तयार झाली. ते यंका जातीच्या पानांमध्ये काहीसे कमी तीव्रतेने तयार झाले. वरच्या थराच्या पानांमध्ये ओस्पोर्सची कमाल संख्या उलादार जातीच्या पानांमध्ये दिसून आली; नंतर, कमी होत असलेल्या क्रमाने, झोराच्का, ओसिरिस, यांका, इलिंस्की, सँड्रीन गेले, परंतु सर्व फरक सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण नव्हते.
तांदूळ. 1. बटाटा बुशच्या वेगवेगळ्या थरांच्या पानांमध्ये ओस्पोर्सची निर्मिती. खालची पाने बुशच्या तीन खालच्या पातळीची पाने आहेत, वरची पाने झाडाच्या वरच्या भागापासून 3-4 जटिल पाने आहेत, मधली झाडे बुशच्या मध्यभागी आहेत.
एरर बार 0,05 च्या महत्त्वाच्या पातळीसाठी आत्मविश्वास मध्यांतर दर्शवतात.
शेतात, सूक्ष्म हवामान परिस्थिती देखील बुशच्या खालच्या आणि मधल्या पानांमध्ये ओस्पोर्सच्या निर्मितीमध्ये योगदान देते: उच्च आर्द्रता, कमी सौर पृथक्करण आणि दैनंदिन तापमान चढउतार (हॅरिसन, 1992). वरच्या फवारणीमुळे बुशच्या तळाशी आणि मध्यभागी कमी कीटकनाशके येतात. ओस्पोर्सची निर्मिती कमी करण्यासाठी, तंत्रज्ञानाचा वापर केला पाहिजे ज्यामुळे बुशच्या खालच्या आणि मधल्या भागात यशस्वीरित्या बुरशीनाशक वितरीत केले जाऊ शकते. अशांत हवा फवारणी करणारे आणि बुशच्या उपचार न केलेल्या भागांमध्ये पसरणारे प्रणालीगत बुरशीनाशक वापरून चांगले परिणाम मिळू शकतात.
हे कार्य रशियन सायन्स फाउंडेशन (प्रकल्प क्रमांक 14-50-00029) द्वारे समर्थित होते.
"बटाटा संरक्षण" जर्नलमध्ये लेख प्रकाशित केला गेला (क्रमांक 2, 2015)